层析法的最大特点是分离效率高，它能分离各种性质极相类似的物质，而且它既可以用于少量物质的分析鉴定，又可用于大量物质的分离纯化制备。

由于填料的不同，层析技术的原理也不完全相同。但主要包括以下几种基本原理：分子筛作用、离子交换作用、亲和层析作用等等。分子筛作用是由于填料上有一定规格的孔径，分子量大小不一样的样品流过柱子时所受到的作用力不一样，所走的路径也不同，所以流出柱子的时间也就有了差异，不同组分得以分开。离子交换是由于正负电荷的吸引而使样品挂在填料上，改变溶液环境，使样品分子所带的电荷产生变化，从而被洗脱下来，不同组分与柱料的吸附作用力时不同的，从而洗脱条件也是不同的。亲和层析就是柱料与被分离样品特异性的吸附结合一起，从而使被分离物质与其他成份分离开来。

适用范围：

1．蛋白质分子量的测定；2．蛋白质的分离纯化；3．多糖的分子量测定；4．多糖的分离纯化；5. 生物活性物质的分离

A.      氨基酸的纸层析

A.      柱层析分离胡萝卜素